본 홈페이지는 산업통상자원부의 과제에서 일부 지원 받았음을 알립니다.
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1. 원심분리한 Fat이 담긴 Squeezing (Mesh type) syringe(ⓐ)의 입구 마개를 돌려서 연다.
2. Collagenase(ⓑ)가 든 Squeezing (Meshless type) syringe(ⓑ)와 Fat이 들어있는Squeezing (Mesh type) syringe(ⓐ) 를 연결 한다.
3. Fat과 Collagenase가 혼합된 Squeezing(Meshless type) syringe(ⓑ)를 멸균된 Rack에 담아 효소 처리용 배양기에 넣고 효소 처리 한다.
4. 꺼낸 Squeezing (Meshless type) syringe(ⓑ)를 원심분리기에서 원심분리 한다.
5. 빈 Squeezing (Mesh type) syringe(ⓐ) 를 아래로 눌러 상층액은 수거하고 Pellet을 남긴다.
6. Pellet만 남은 Squeezing (Meshless type) syringe(ⓑ) 에 Washing solution을 주입한다.
7. Pellet + Washing solution이 담긴 Squeezing (Meshless type) syringe(ⓑ)를 원심분리기 에서 원심 분리 한다.
8. 빈 Squeezing (Mesh type) syringe(ⓐ。)를 아래로 눌러 상층액을 분리한 후폐기한다.
9. Pellet만 남은 Squeezing (Meshless type) syringe(ⓑ) 에 입구의 마개를 돌려서 열고 High serum media가 담긴 Syringe를 연결한다.
10. Pellet이 담긴 Syringe에 Needle(18~23G)를 연결한다.
11. Hemocytometer에 10㎕를 떨어뜨려 세포 모니터링 현미경으로 관찰 하고, Software program을 이용하여 계수 한다.
12. 밀폐배양용기 측면 주입구에 Syringe를 꽂아 Seeding한다.
13. 압력조절 배양기에서 배양한다.
1. Water bath에 넣고 녹인다.
2. High Serum Media가 담긴 Syringe에 해동된 세포를 넣어 세포를 희석 시킨다.
3. Syringe bucket에 10cc Syringe의 입구가 위로 향하도록 장착하여 원심분리한다.
4. 상층액을 수거하여 폐기한다.
5. High serum media가 담긴 Syringe와 Pellet이 담긴 Syringe를 연결한다.
6. Hemocytometer에 10㎕를 떨어뜨려 세포 모니터링 현미경으로 관찰 하고, Software program을 이용하여 계수한다.
7. 계수한 세포를 Loading하고자 하는 세포 농도만큼 배양 용기에 Seeding 한다.
8. 압력조절 배양기에서 배양한다.
1. 세포 모니터링 현미경을 이용 하여 밀폐배양용기에 세포를 확인하고 Cell counting 을 한다.
2. 밀폐배양용기에 배양된 90% Confluency한 상태의 세포를 Scraping grip 자석을 이용하여 자력이 미치도록 가까이 댄다.
＊기존에 붙어있던 자석은 떼어낸다.
3. Scraping grip 자석을 움직여 Scraping을 한다.
4. 밀폐배양용기 측면 주입 구에 Syringe를 꽂아 세포를 수거한다.
5. Syringe bucket에 10cc Syringe의 입구가 위로 향하도록 장착하여 원심분리한다.
6. 상층액을 수거하여 폐기한다.
7. Stock solution이 담긴 Syringe와 Pellet이 담긴 Syringe를 연결한다.
8. 혼합된 용액을 거품이 발생하지 않도록 동결용 Vial (Cryo tube)에 옮겨 담는다.
9. 동결된 세포를 꺼내어 Cryotube storage box에 넣는다.
10. 액화 질소탱크에 보관하고, 차트에 입력한다.
1. 세포 모니터링 현미경을 이용 하여 밀폐배양용기에 세포를 확인하고 Cell counting 을 한다.
2. 밀폐배양용기에 배양된 90% Confluency한 상태의 세포를 Scraping grip 자석을 이용 하여 자력이 미치도록 가까이 댄다.
＊기존에 붙어있던 자석은 떼어낸다.
3. Scraping grip 자석을 움직여 Scraping을 한다.
4. 밀폐배양용기 측면 주입 구에 Syringe를 꽂아 세포를 수거한다.
5. Syringe bucket에 10cc Syringe의 입구가 위로 향하도록 장착하여 원심분리한다.
6. 상층액을 수거하여 폐기한다.
7. Medical washing solution이 담긴 Syringe와 Pellet이 담긴 Syringe를 연결한다.
8. Syringe bucket에 10cc Syringe의 입구가 위로 향하도록 장착하여 원심분리한다.
9. Pellet만 남은 10cc syringe 를 수술실에 제공한다.